支原體(tǐ)污染
支原體(tǐ)是一類缺乏細胞壁呈高(gāo)度多(duō)形性的原核細胞型微生(shēng)物,大(dà)小(xiǎo)為(wèi)0.1~0.3微米,所以除菌濾器(qì)無法正常對支原體(tǐ)進行(xíng)濾除,是目前所知能在無生(shēng)命培養基中生(shēng)長繁殖的最小(xiǎo)的微生(shēng)物。在細胞培養過程中,支原體(tǐ)感染發生(shēng)率達到63%,當細胞(特别是傳代細胞)被支原體(tǐ)污染後,細胞內(nèi)的DNA、RNA及蛋白表達發生(shēng)改變,而細胞的生(shēng)長率一般并未發生(shēng)顯著的影(yǐng)響,因而細胞被支原體(tǐ)污染一般難以察覺。
支原體(tǐ)污染的影(yǐng)響:
1、影(yǐng)響細胞的生(shēng)長狀态及形态
支原體(tǐ)可(kě)使培養液中支持細胞生(shēng)長的營養物質含量減少(shǎo),造成細胞生(shēng)長緩慢甚至停止;細
胞狀态變差,生(shēng)長變慢,在顯微鏡下觀察可(kě)能會(huì)有(yǒu)小(xiǎo)黑(hēi)點,但(dàn)培養基一般不發生(shēng)渾濁。會(huì)導
緻細胞微管解聚,引起細胞一系列病變,表現為(wèi)細胞收縮、貼壁細胞脫落、裂解等。細胞傳
代以後就出現細胞間(jiān)黑(hēi)點,細胞空(kōng)泡化,很(hěn)多(duō)類似凋亡、壞死的細胞,最終細胞漂浮,完全
死亡。
2.影(yǐng)響細胞的代謝和(hé)功能
培養液中的精氨酸被支原體(tǐ)大(dà)量消耗,引起細胞蛋白質、DNA、rRNA、mRNA的合成障礙;支原體(tǐ)活動使培養基成分發生(shēng)改變,影(yǐng)響細胞代謝;支原體(tǐ)吸附在細胞表面,破壞細胞膜的完整性,影(yǐng)響細胞信号傳遞;支原體(tǐ)消耗細胞的核苷庫—染色體(tǐ)異常。
3、其他
此外,支原體(tǐ)污染還(hái)會(huì)影(yǐng)響一些(xiē)病毒在細胞中的産量、使惡性細胞緻癌能力下降、影(yǐng)響
淋巴細胞分化等。
支原體(tǐ)污染來(lái)源:
包括工作(zuò)環境的污染、操作(zuò)者本身的污染、培養基的污染、污染支原體(tǐ)的細胞造成的交叉污染、實驗器(qì)材帶來(lái)的污染和(hé)用來(lái)制(zhì)備細胞的原始組織或器(qì)官的污染。
預防及處理(lǐ):
控制(zhì)環境污染、嚴格實驗操作(zuò)、細胞培養基和(hé)器(qì)材要保證無菌、在細胞培養基中加入适量的抗生(shēng)素。
