01

透析

透析，一種小(xiǎo)分子能夠在半透膜上(shàng)的孔自由通(tōng)過，大(dà)分子不能通(tōng)過該孔而被截留在半透膜內(nèi)，實現大(dà)分子物質和(hé)小(xiǎo)分子物質分離純化的實驗方法；

透析隻需要使用專用的半透膜即可(kě)完成。通(tōng)常是将半透膜制(zhì)成袋狀，将生(shēng)物大(dà)分子樣品溶液置入袋內(nèi)，将此透析袋浸入水(shuǐ)或緩沖液中，樣品溶液中的大(dà)分子量的生(shēng)物大(dà)分子被截留在袋內(nèi)，而鹽和(hé)小(xiǎo)分子物質不斷擴散透析到袋外，直到袋內(nèi)外兩邊的濃度達到平衡為(wèi)止。

保留在透析袋內(nèi)未透析出的樣品溶液稱為(wèi)“保留液”，袋（膜）外的溶液稱為(wèi)“滲出液”或“透析液”

02

透析分離物質的優缺點

優點

樣品回收率高(gāo)；操作(zuò)簡單，無需繁瑣準備工作(zuò)；分離條件溫和(hé)。

缺點

耗時(shí)較長；樣品和(hé)雜質之間(jiān)的分子量差較大(dà)。

03

幹型透析袋使用方法

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1

剪取适當長度的透析袋（如10cm）；

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2

在大(dà)體(tǐ)積（500ml）的2%(W/V)碳酸氫鈉和(hé) 1mmol/L EDTA.2Na (pH 8.0)中，将其煮沸10分鍾；

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3

取出後用蒸餾水(shuǐ)徹底清洗透析袋；

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4

再放在500ml的1mmol/L EDTA.2Na(pH 8.0)中将其煮沸10分鍾，取出後再用蒸餾水(shuǐ)徹底清洗；

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5

暫不使用的話(huà)需要将透析袋完全浸泡到透析袋儲存液中，可(kě)存放于4-37度；

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6

浸泡在透析袋儲存液中的透析袋取出使用前，須将透析袋內(nèi)裝滿水(shuǐ)然後排出，将之清洗幹淨，內(nèi)外沖洗三次方可(kě)。

小(xiǎo)提示：實驗要求不高(gāo)的可(kě)以用簡易處理(lǐ)方法，即在沸水(shuǐ)中煮10min即可(kě)使用。

04

下述透析程序是一個(gè)普遍的基礎透析過程

在開(kāi)始透析之前應考慮到許多(duō)變數(shù)。透析樣品溶劑、膜的化學相容性、膜的截留分子量，透析溶劑、透析體(tǐ)積、溫度等變量都會(huì)影(yǐng)響透析速率，因此，一些(xiē)應用中下述透析過程可(kě)能需要适當的變化。

1.把适量的透析液（緩沖液）加入透析裝置；

2.裁剪适當長度的透析管，預留一段額外長度；

3.把透析管插入打開(kāi)的透析夾，在約超出透析夾3-5毫米的位置再夾住。不要折疊透析袋；

4.由透析管開(kāi)口端将樣品裝入。調整一下頂部空(kōng)間(jiān)的長度，夾緊透析夾；

5.把透析樣品放在合适的透析緩沖液中；

6.透析要根據具體(tǐ)的應用需求。通(tōng)常情況下，允許過夜透析。在持續透析的過程中，至少(shǎo)要進行(xíng)3次全部更換透析液。建議在（透析後）2-4小(xiǎo)時(shí)，6-8小(xiǎo)時(shí)和(hé)10-14小(xiǎo)時(shí)（第2天早晨）更換透析液。在最後一次透析液的更換後要至少(shǎo)繼續進行(xíng)2小(xiǎo)時(shí)的透析。

05

使用注意事項

a.透析袋不可(kě)以長期浸泡在純水(shuǐ)中，易被污染；

b.樣品濃度不可(kě)太大(dà)；

c.樣品和(hé)透析液體(tǐ)積比一般是1:50~500；

d.樣品濃度越高(gāo)，透析所需時(shí)間(jiān)越長，透析液需要更頻繁的更換；

e.在适當的儲存情條件下，保質期為(wèi)兩年。（備注：一旦變潮濕，不要讓透析袋幹燥，會(huì)造成孔隙結構不可(kě)恢複的倒塌）。