細胞培養緩沖液——PBS\\/DPBS
磷酸鹽緩沖液是一種平衡鹽溶液,主要用途是一些(xiē)化學實驗中不影(yǐng)響實驗反應的情況下調節pH值,以便讓實驗的化學反應在最佳條件下進行(xíng)。部分用于食品或是飼料行(xíng)業加工,如食品或者飼料真菌毒素檢驗中Elisa方法的洗闆應用或者食品微生(shēng)物檢驗中的稀釋緩沖液。

在清洗細胞時(shí),有(yǒu)時(shí)會(huì)使用生(shēng)理(lǐ)鹽水(shuǐ),但(dàn)其并不具備緩沖能力,而磷酸鹽緩沖液除了 NaCl 外,還(hái)有(yǒu)KCl、Na2HPO4 和(hé) KH2PO4 成分,可(kě)以在溫度、氣體(tǐ)組成變化時(shí)緩沖,且pH 值範圍很(hěn)廣,以此保證正常的pH和(hé)滲透壓,對細胞膜和(hé)離子通(tōng)道(dào)有(yǒu)更好的保護作(zuò)用,因此,生(shēng)理(lǐ)鹽水(shuǐ)并不能代替磷酸鹽緩沖液使用。

PBS
PBS(Phosphate-Buffered Saline,即磷酸鹽緩沖液),能夠提供相對穩定的離子環境和(hé)pH 緩沖能力,pH7.2-7.4,與人(rén)體(tǐ) pH 相近,溶液滲透壓與人(rén)體(tǐ)血液等滲,一般作(zuò)為(wèi)溶劑,起溶解保護試劑的作(zuò)用。是生(shēng)物學中經常使用的緩沖鹽溶液,用于分子克隆、細胞培養及其檢測等實驗。
DPBS
DPBS(Dulbecco's Phosphate-Buffered Saline,即杜氏磷酸鹽緩沖液),也是一種磷酸鹽緩沖液,與常規PBS的不同之處在于磷酸鹽的含量稍低(dī)些(xiē),并含有(yǒu)鈣鎂離子,多(duō)用于處理(lǐ)較脆弱的細胞,DPBS主要用于胚胎學方面的研究,多(duō)用于胚胎的沖洗液、凍存液和(hé)培養液。pH7.2-7.4,與人(rén)體(tǐ) pH 相近,溶液滲透壓與人(rén)體(tǐ)血液等滲,不含Ca2+、Mg2+。适用于各種細胞培養應用,例如解離前清洗細胞、運輸細胞或組織、稀釋細胞進行(xíng)計(jì)數(shù)和(hé)制(zhì)備試劑。
DPBS 是細胞清洗、标本稀釋的首選。與常規的PBS相比,DPBS 中不含 Ca2+和(hé) Mg2+。Ca2+、Mg2+作(zuò)為(wèi)細胞膜的重要組成成分,參與細胞粘附等功能,使用不含 Ca2+、Mg2+的 DPBS 可(kě)避免細胞結團,維持細胞滲透壓平衡,保持 pH 穩定,供細胞和(hé)組織一個(gè)相對穩定的離子環境;在細胞消化過程,如使用 PBS 進行(xíng)清洗細胞,Ca2+的殘留也會(huì)影(yǐng)響胰酶活性,緻使細胞難以消化。
注意
1.上(shàng)述DPBS Buffer中無二價陽離子,如需要,可(kě)在配方中補充1mm CaCl2和(hé)0.5mm MgCl2。
2.可(kě)以加入葡萄糖、丙酮酸鈉等,以更利于培養物的生(shēng)長。
3.DPBS磷酸鹽緩沖液已用于稀釋新鮮紅細胞用于研究紅細胞聚集物的捕獲.它還(hái)用于洗滌微孔闆中的孔.
4.DPBS是一種用于處理(lǐ)和(hé)培養哺乳動物細胞的平衡鹽溶液。
5.鈣和(hé)鎂離子的作(zuò)用及有(yǒu)助于細胞的結合和(hé)成團。
