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目的：使抗原位點暴露出來(lái)

材料：檸檬酸緩沖液

清水(shuǐ)沖洗玻片，然後連同架子放入檸檬酸緩沖液中，在微波爐中煮沸，然後室溫冷卻。

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目的：封閉非特異性結合位點

材料：免疫組化筆

室溫冷卻後将檸檬酸倒掉，并在染色缸中用PSB清洗玻片。用免疫組化筆在玻片上(shàng)畫(huà)圈防止試劑流出，滴加封閉血清，于恒溫箱中37℃孵育30min。

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材料：PBS緩沖液

将載玻片取出，倒去血清，滴加一抗，4℃冰箱保存過夜。取出後用PBS清洗玻片。然後同樣操作(zuò)依次滴加二抗、SABC、顯色劑、并每次用PBS洗滌玻片。

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材料：蘇木素染色液

取玻片浸泡于蘇木素染色液中，一般動物組織染30s，植物組織染3-5min，蒸餾水(shuǐ)水(shuǐ)洗，1%鹽酸酒精中脫色，浸泡水(shuǐ)洗。

注意：具體(tǐ)複染時(shí)間(jiān)根據染色效果進行(xíng)調整。

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将複染結束的玻片依次浸泡于70%，85%，100%酒精中梯度脫水(shuǐ)，每缸3min；二甲苯三缸，每缸2min。

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材料：中性樹(shù)脂

最後中性樹(shù)脂滴在玻片組織旁進行(xíng)封片，通(tōng)風櫥晾幹，觀察實驗結果及拍照。