1. 從液氮或-80℃冰箱中取出凍存細胞，馬上(shàng)放入37℃水(shuǐ)浴鍋中，并不時(shí)地攪拌，使細胞在2min內(nèi)快速解凍。

2. 待其融化之後，用75%酒精擦拭冷凍管外部，在超淨台中打開(kāi)凍存管蓋子，吸取細胞懸液加入至含有(yǒu)完全培養基的離心管中，低(dī)速離心5min後棄去上(shàng)清液，再加入适量完全培養基輕輕吹打，使細胞重懸。

3. 将重懸後的細胞緩慢加入到含有(yǒu)培養液的培養瓶，十字輕晃細胞培養瓶令細胞分布均勻，然後放入恒溫培養箱中進行(xíng)培養。

1. 整個(gè)過程應在超淨台中進行(xíng)，注意嚴格使用無菌操作(zuò)技(jì)術(shù)。

2. 解凍過程務必快速，如果複溫速度太慢，會(huì)造成細胞損傷。

3. 凍存管放入水(shuǐ)浴中注意用鑷子夾住細胞凍存管并在水(shuǐ)浴中不時(shí)晃動，使其受熱均勻，并防止水(shuǐ)浴時(shí)水(shuǐ)進入細胞凍存管內(nèi)造成污染。

4.打開(kāi)細胞凍存管之前要用酒精棉球将凍存管消毒并晾幹。

5.液氮操作(zuò)有(yǒu)一定的危險性，打開(kāi)液氮罐取出細胞凍存管時(shí)，戴上(shàng)防護眼鏡。